乳酸菌的筛选、分离、鉴定:根据菌落的大小、透明程度、颜色、表面是否光滑、凸起等特征用mrs培养基从泡菜中筛选出15株阳性菌株,然后转接于mrs固体培养基中,通过复筛,选出1株菌落呈圆形、直径1.0-1.5mm,凸起、微白色、湿润、边缘整齐,革兰氏阳性无芽孢杆菌,初步命名为w菌株。分子生物学鉴定结果:对菌株进行16s rdna基因克隆、测序,通过ncbi中使用blast软件比对,将相似度高的序列用mega软件编辑,通过upgma计算法构建比对进化树,综合生理生化试验结果,确定该菌株为植物乳杆菌(lactobacilus plantarum)。
植物乳杆菌具有很多的保健作用,如下:①有一定的免疫调节作用;②对致病菌有抑制作用;③降低血胆固醇含量和预防心血管疾病;④维持肠道内菌群平衡;⑤促进营养物质吸收;⑥缓解乳糖不耐症;⑦阻拦坏死细胞的形成等。植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)是一种常用于酸奶及发酵乳制品生产的乳酸菌,被列入《可用于食品的菌种名单》(卫办监督发[2010]65号)。
乳酸菌的分离、鉴定:无菌操作条件下,称取5g泡菜,碾碎,加入装有玻璃珠的三角瓶中,再加入50ml灭菌生理盐水,充分震荡后用生理盐水做10倍的梯度稀释,取10-4和10-5稀释度做平板涂布,置于37℃生化培养箱培养24h。选取表面光滑凸起,周边整齐,直径1.0~1.5mm的菌落,做革兰氏染色,再对革兰氏阳性杆状无芽孢菌落,多次划线培养直至得到纯菌株。最后依据《常见细菌系统鉴定手册》对菌株进行生理生化实验。
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